(12分)科學(xué)家將人的生長激素基因與大腸桿菌的DNA分子進(jìn)行重組,并成功地在大腸桿菌中得以表達(dá)。過程如下圖,據(jù)圖回答:
(1)過程①表示采取 的方法來獲取目的基因。
(2)形成圖中②含有目的基因的DNA(重組質(zhì)粒)需要的酶包括: 和 。
(3)基因工程中常用的載體除有質(zhì)粒外,還有 。重組質(zhì)粒包括啟動子、 、 及終止子等部分。
(4)圖中③過程用人工方法,使體外重組的DNA分子轉(zhuǎn)移到受體細(xì)胞內(nèi),一般將受體大腸桿菌用 處理,使細(xì)胞成為 ,從而使含有目的基因的重組質(zhì)粒容易進(jìn)入受體細(xì)胞。檢測大腸桿菌B是否導(dǎo)入了質(zhì);蛑亟M質(zhì)粒,可采用的方法是將得到的大腸桿菌B涂布在含有 的培養(yǎng)基上,若細(xì)菌能夠生長,說明:已導(dǎo)入了重組質(zhì);蚱胀ㄙ|(zhì)粒A,理由: 。
(5)基因工程的第四步中,檢測目的基因是否插入受體細(xì)胞的染色體DNA上、檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì),用到的技術(shù)分別是 、 。
(1)反轉(zhuǎn)錄法 (2)限制性核酸內(nèi)切酶、DNA連接酶
(3)λ噬菌體的衍生物(動植物病毒) 目的基因 標(biāo)記基因
(4)氯化鈣 感受態(tài)細(xì)胞 (氨芐)青霉素 普通質(zhì)粒和重組質(zhì)粒都含有抗氨芐青霉素的基因
(5)DNA分子雜交技術(shù) 抗原-抗體雜交技術(shù)
【解析】
試題分析:(1)由RNA來獲得DNA用的是反轉(zhuǎn)錄法。
(2)運(yùn)用的工具酶有限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶。
(3)常用的運(yùn)載體有質(zhì)粒、動植物病毒、λ噬菌體的衍生物。重組質(zhì)粒必須包含啟動子,終止子,目的基因和標(biāo)記基因。
(4)用氯化鈣處理大腸桿菌細(xì)胞可以使其處于感受態(tài)狀態(tài)。因本題上有2個標(biāo)記基因,但抗四環(huán)素基因被插入的基因破壞掉了,因此剩下的是抗氨芐青霉素抗性基因,如果在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上能生長,說明已經(jīng)導(dǎo)入了重組質(zhì);蚱胀ㄙ|(zhì)粒A,因?yàn)槠胀ㄙ|(zhì)粒和重組質(zhì)粒都含有抗氨芐青霉素的基因。
(5)目的基因檢測在DNA水平上可用DNA分子雜交技術(shù),是否翻譯成蛋白質(zhì)用抗原-抗體雜交技術(shù)。
考點(diǎn):本題考查基因工程相關(guān)知識,意在考察考生對知識點(diǎn)的掌握及對信息提取分析運(yùn)用能力。
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科目:高中生物 來源: 題型:
科學(xué)家將人的生長激素基因與pBR322質(zhì)粒進(jìn)行重組,得到的重組質(zhì)粒導(dǎo)入牛的受精卵,使其發(fā)育為轉(zhuǎn)基因牛,再通過細(xì)胞工程培育為轉(zhuǎn)基因克隆牛。pBR322質(zhì)粒含有兩個抗生素抗性基因和5個限制酶切點(diǎn)(如圖2)。將重組質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌,并成功地在大腸桿菌中得以表達(dá)。請據(jù)圖回答問題。
(1)圖1中顯示的人的生長激素基因是通過人工合成的,圖中①過程需要的酶是________。該過程所依據(jù)的堿基互補(bǔ)配對原則是________________(用字母和箭頭表示)。
(2)圖1中的mRNA是從人體的哪些細(xì)胞中獲取的?
________________________。
(3)重組質(zhì)粒形成與否需要鑒定和篩選,方法是將重組質(zhì)粒的DNA分子導(dǎo)入大腸桿菌,通過含抗生素的培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng),觀察大腸桿菌的生長、繁殖情況進(jìn)行判斷,如圖3所示:
①如果受體菌在培養(yǎng)基A上能生長、繁殖形成菌落,而不能在培養(yǎng)基B上生長、繁殖,則使用限制酶a的切點(diǎn)是圖2中的________,即目的基因插入了________中。
②如果受體菌在培養(yǎng)基A上不能生長、繁殖形成菌落,而在培養(yǎng)基B上能生長、繁殖,則使用限制酶a的切點(diǎn)是圖2中的________,即目的基因插入了________中。
③如果受體菌在培養(yǎng)基A和培養(yǎng)基B上都能生長、繁殖形成菌落,則使用限制酶a的切點(diǎn)是圖2中的________。
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科目:高中生物 來源:2010年江蘇省江都中學(xué)高二第二學(xué)期期末考試生物試題 題型:綜合題
(8分)科學(xué)家將人的生長激素基因與大腸桿菌的DNA分子進(jìn)行重組,并成功地在大腸桿菌中得以表達(dá)。但在進(jìn)行基因工程的操作過程中,需使用特定的限制酶切割目的基因和質(zhì)粒,便于重組和篩選。已知限制酶I的識別序列和切點(diǎn)是—G↓GATCC— ,限制酶II的識別序列和切點(diǎn)是—↓GATC—,據(jù)圖回答:
(1)由上述質(zhì)粒結(jié)構(gòu)圖可知基因工程中的載體至少應(yīng)具備的條件是
①_________________________________ ,②_________________________________ 。
(2)根據(jù)圖示分析,在構(gòu)建基因表達(dá)載體過程中,應(yīng)選用限制酶_________(填“I”或“II”)切割質(zhì)粒,再用_____________縫合目的基因和質(zhì)粒之間的缺口,可獲得_____種重組質(zhì)粒。
(3)將得到的大腸桿菌B涂布在一個含有_____________的培養(yǎng)基上,待平板冷凝后為避免污染,需將培養(yǎng)皿呈________狀態(tài)放置。經(jīng)過一定時間培養(yǎng)后,能夠在培養(yǎng)基上生長的,說明已導(dǎo)入了__________________________,反之則沒有導(dǎo)入。
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科目:高中生物 來源:2010-2011學(xué)年高考復(fù)習(xí)單元檢測:第五章基因突變和其它變異;第六章從雜交育種到基因工程 題型:選擇題
美國科學(xué)家將人的生長激素基因轉(zhuǎn)移到了小鼠體內(nèi),得到了超級小鼠,此轉(zhuǎn)基因技術(shù)的受體細(xì)胞是( )
A.卵細(xì)胞 B.去核卵細(xì)胞
C.受精卵細(xì)胞 D.乳腺上皮細(xì)胞
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科目:高中生物 來源:2010屆山東省淄博市高三一模理綜生物 題型:綜合題
科學(xué)家將人的生長激素基因與質(zhì)粒重組后,導(dǎo)入牛的受精卵,并成功從牛奶中提取到了人生長激素,操作流程如下圖所示,請據(jù)圖回答。(已知限制酶I的識別序列和切點(diǎn)是-G↓GATCC- ,限制酶II的識別序列和切點(diǎn)是-↓GATC-)。
(1)獲取目的基因的主要途徑包括從已有物種細(xì)胞中提取和____________。
(2)據(jù)圖分析,在構(gòu)建重組質(zhì)粒的過程中,目的基因用________進(jìn)行了切割。
(3)獲能的精子和卵細(xì)胞相遇后首先發(fā)生______反應(yīng),之后精子接觸卵黃膜,并進(jìn)一步與卵結(jié)合,在該過程中,____________和____________可以防止其它精子入卵。
(4)圖中“受體”是________________________;“符合要求的個體”是指________________________。
(5)將牛受精卵進(jìn)行人工培養(yǎng)后,一般可選擇____________期的、發(fā)育良好的胚胎進(jìn)行移植。
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科目:高中生物 來源:2013屆河北省高一第二學(xué)期期末考試生物試卷 題型:選擇題
美國科學(xué)家將人的生長激素基因轉(zhuǎn)移到了小鼠體內(nèi),得到了超級小鼠,此轉(zhuǎn)基因技術(shù)的受體細(xì)胞是( )
A.卵細(xì)胞 B.去核卵細(xì)胞 C.受精卵細(xì)胞 D.乳腺上皮細(xì)胞
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