Question

7．轉(zhuǎn)基因、核移植，或體外受精等技術(shù)獲得的胚胎，都必須移植給受體才能獲得后代．因此胚胎移植又是胚胎工程其他技術(shù)的最后一道“工序”．
（1）為目的基因在受體細(xì)胞中高效表達(dá)，需要把來自 cDNA 文庫(kù)的目的基因片段正確插入基因表達(dá)載體的啟動(dòng)子和終止子之間．要將目的基因?qū)�入�?dòng)物受精卵 中，常用顯微注射法．
（2）進(jìn)行核移植時(shí)，從供體高產(chǎn)牛身體的某一部位上取體細(xì)胞，并用胰蛋白（或膠原蛋白）酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞．培養(yǎng)時(shí)，充入 CO₂的主要作用是 維持培養(yǎng)液的pH．
（3）體外受精時(shí)，要對(duì)精子進(jìn)行體外進(jìn)行的獲能處理．受精的卵母細(xì)胞要培養(yǎng)到MII期．
（4）為讓母畜超數(shù)排卵，可注射促性腺激素．胚胎移植的受體畜要進(jìn)行同期發(fā)情處理．若取囊胚進(jìn)行胚胎分割，必須要將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)平均分割．

Answer 1

分析 1、基因工程技術(shù)的基本步驟：
（1）目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫(kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成．
（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等．
（3）將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法．
（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定．
2、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中，細(xì)胞會(huì)表現(xiàn)接觸抑制的現(xiàn)象，因此需定期用胰蛋白酶處理進(jìn)行分裝培養(yǎng)；在培養(yǎng)過程中要求一定的培養(yǎng)條件：（1）無菌、無毒的環(huán)境：①消毒、滅菌②添加一定量的抗生素③定期更換培養(yǎng)液，以清除代謝廢物．（2）營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)：糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無機(jī)鹽、微量元素等，還需加入血清、血漿等天然物質(zhì)．（3）適宜的溫度和PH．（4）氣體環(huán)境．

解答 解：（1）啟動(dòng)子啟動(dòng)基因的轉(zhuǎn)錄，終止子終止基因的轉(zhuǎn)錄，為目的基因在受體細(xì)胞中高效表達(dá)，需要把來自 cDNA 文庫(kù)的目的基因片段正確插入基因表達(dá)載體的啟動(dòng)子和終止子之間．要將目的基因?qū)�入�?dòng)物受精卵中，常用顯微注射法．
（2）進(jìn)行核移植時(shí)，從供體高產(chǎn)牛身體的某一部位上取體細(xì)胞，并用胰蛋白（或膠原蛋白）酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞．培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)液中充入 CO₂，用以維持培養(yǎng)液的pH．
（3）體外受精時(shí)，要對(duì)精子進(jìn)行體外進(jìn)行的獲能處理．受精的卵母細(xì)胞要培養(yǎng)到MII期．
（4）為讓母畜超數(shù)排卵，可注射促性腺激素．胚胎移植的受體畜要進(jìn)行同期發(fā)情處理．若取囊胚進(jìn)行胚胎分割，必須要將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)平均分割．
故答案為：
（1）啟動(dòng)子     終止子     顯微注射
（2）胰蛋白（或膠原蛋白）     維持培養(yǎng)液的 pH
（3）獲能      MII
（4）促性腺激素   同期發(fā)情      內(nèi)細(xì)胞團(tuán)

點(diǎn)評(píng) 本題考查了基因工程和胚胎工程的有關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因的原理和操作步驟，識(shí)記動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過程以及培養(yǎng)條件，掌握胚胎工程中體外受精技術(shù)以及胚胎移植技術(shù)中相關(guān)知識(shí)點(diǎn)．