Question

【題目】科學(xué)家用轉(zhuǎn)基因方法培育“巨型小鼠”。圖1為含大鼠生長(zhǎng)激素基因的DNA及限制酶切割位點(diǎn)示意圖；圖3是轉(zhuǎn)基因過(guò)程中的一個(gè)步驟。請(qǐng)回答:

（1）據(jù)圖推斷，在獲得目的基因時(shí)，應(yīng)使用限制酶____________酶。

（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建是基因工程的核心，其目的是________________________，可以選擇圖2中的質(zhì)粒____________作為目的基因的載體，理由是____________。

（3）圖3表示基因工程中將重組DNA分子導(dǎo)入受體細(xì)胞的過(guò)程，該步驟采用的技術(shù)方法是____________，通常____________選擇作為受體細(xì)胞。

（4）獲得含目的基因的細(xì)胞后，該細(xì)胞需要進(jìn)行____________，當(dāng)胚胎發(fā)育到____________階段時(shí)，可將其取出向受體移植，再經(jīng)分娩產(chǎn)仔可獲得“巨型小鼠”。

Answer 1

【答案】 PvuI酶 使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在，并且可以遺傳給下一代，同時(shí)，使目的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用 A 選擇質(zhì)粒A，其復(fù)制原點(diǎn)則不會(huì)被限制酶切割，復(fù)制原點(diǎn)序列保持完整（在用切割目的基因的限制酶切割質(zhì)粒B時(shí)，其復(fù)制原點(diǎn)會(huì)被限制酶切割，從而影響重組質(zhì)粒的自主復(fù)制） 顯微注射法 受精卵 胚胎體外培養(yǎng) 囊胚期

【解析】【試題分析】

本題結(jié)合培育轉(zhuǎn)基因“巨型小鼠”的過(guò)程，考查基因工程和胚胎工程的相關(guān)知識(shí)�？忌�可根據(jù)題圖獲取有用的信息，例如各限制酶的切割位點(diǎn)等，然后根據(jù)題意梳理所學(xué)知識(shí)，對(duì)各小題進(jìn)行分析作答。

（1）據(jù)圖可知，EcoRⅠ酶的識(shí)別和切割位點(diǎn)位于目的基因（生長(zhǎng)激素基因）上，所以獲得目的基因時(shí)，只能使用限制酶PvuI酶。

（2）構(gòu)建基因表達(dá)載體的目的是使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在，并且可以遺傳給下一代，同時(shí)，使目的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用；根據(jù)第（1）題的分析可知，獲取目的基因只能使用限制酶PvuI酶，而該酶的識(shí)別和切割位點(diǎn)位于質(zhì)粒B的復(fù)制原點(diǎn)上，所以可以選擇圖2中的質(zhì)粒A作為目的基因的載體，理由是選擇質(zhì)粒A，其復(fù)制原點(diǎn)則不會(huì)被限制酶切割，復(fù)制原點(diǎn)序列保持完整（在用切割目的基因的限制酶切割質(zhì)粒B時(shí)，其復(fù)制原點(diǎn)會(huì)被限制酶切割，從而影響重組質(zhì)粒的自主復(fù)制）。

（3）圖3表示基因工程中將重組DNA分子導(dǎo)入受體細(xì)胞的過(guò)程，該步驟采用的技術(shù)方法是顯微注射法，通常受精卵選擇作為受體細(xì)胞。

（4）獲得含目的基因的細(xì)胞后，該細(xì)胞需要進(jìn)行胚胎體外培養(yǎng)，當(dāng)胚胎發(fā)育到囊胚階段時(shí)，可將其取出向受體移植，再經(jīng)分娩產(chǎn)仔可獲得“巨型小鼠”。