Question

回答基因工程中的有關(guān)問(wèn)題：（15分）

Ⅰ．限制酶是基因工程中的重要工具酶，下表中列出了幾種限制酶識(shí)別序列及其切割位點(diǎn)，圖甲、圖乙中箭頭表示相關(guān)限制酶的酶切位點(diǎn)。請(qǐng)回答下列問(wèn)題：

（1）一個(gè)圖甲所示的質(zhì)粒分子經(jīng)Sma Ⅰ切割前后，分別含有       個(gè)和_______ 個(gè)游離的磷酸基團(tuán)？

（2）若對(duì)圖中質(zhì)粒進(jìn)行改造，插入的SmaⅠ酶切位點(diǎn)越多，質(zhì)粒的熱穩(wěn)定性越        。

（3）與只使用EcoR I相比較，使用BamH Ⅰ和Hind Ⅲ兩種限制酶同時(shí)處理質(zhì)粒、外源DNA的優(yōu)點(diǎn)在于可以防止         。

Ⅱ．原核生物（如大腸桿菌）是基因工程中較理想的受體細(xì)胞，它們具有一些其他生物沒(méi)有的特點(diǎn)：①繁殖快②多為單細(xì)胞③______________等優(yōu)點(diǎn)．大腸桿菌細(xì)胞最常用的轉(zhuǎn)化方法是：首先用_________處理細(xì)胞，使之成為_(kāi)________­­___細(xì)胞，然后完成轉(zhuǎn)化．

Ⅲ．植物基因工程中將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞最常用的方法是__________,且一般將目的基因插入Ｔi質(zhì)粒的____________中形成重組Ｔi質(zhì)粒，這樣可將目的基因整合到受體細(xì)胞的染色體上，科學(xué)家發(fā)現(xiàn)：這樣得到的轉(zhuǎn)基因植株，其目的基因的傳遞符合孟德?tīng)栠z傳規(guī)律，則該轉(zhuǎn)基因植株一般為_(kāi)__________子。若要避免基因污染，一般需將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的__________DNA中。

 

Answer 1

【答案】

Ⅰ（1）0  2  （2）高   （3）質(zhì)粒和含目的基因的外源DNA片斷自身環(huán)化

Ⅱ遺傳物質(zhì)相對(duì)較少  Ca²⁺  感受態(tài)   Ⅲ．農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法  T-DNA   雜合  細(xì)胞質(zhì)（線(xiàn)粒體、葉綠體）

【解析】

試題分析：Ⅰ（1）質(zhì)粒分子經(jīng)Sma Ⅰ切割前，為環(huán)狀DNA，無(wú)游離磷酸基團(tuán)，切割后，Sma Ⅰ會(huì)2個(gè)脫氧核苷酸對(duì)（CG）之間的磷酸二酯鍵，露出2個(gè)游離磷酸基團(tuán)。（2）插入的SmaⅠ酶切位點(diǎn)越多，堿基對(duì)CG越多，氫鍵越多，故質(zhì)粒的熱穩(wěn)定性越高。（3）只使用EcoR I, 質(zhì)粒、外源DNA自身都只含有1對(duì)互補(bǔ)黏性末端，自身會(huì)發(fā)生連接成為環(huán)狀DNA，不利目的基因?qū)�入。故使用BamH Ⅰ和Hind Ⅲ兩種限制酶同時(shí)處理質(zhì)粒、外源DNA，各自會(huì)有不同黏性末端，能防止環(huán)化。

Ⅱ．原核生物（如大腸桿菌 ）是基因工程中較理想的受體細(xì)胞，具有一些其他生物沒(méi)有的特點(diǎn)：

繁殖快，能大量快速?gòu)?fù)制DNA；②多為單細(xì)胞，結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，容易操作；③遺傳物質(zhì)相對(duì)較少，不易對(duì)目的基因干擾。大腸桿菌細(xì)胞最常用的轉(zhuǎn)化方法是：首先用Ca²⁺處理細(xì)胞，使之成為感受態(tài)細(xì)胞，然后完成轉(zhuǎn)化．

Ⅲ．植物基因工程中將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞最常用的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法。且一般將目的基因插入Ｔi質(zhì)粒的T-DNA中形成重組Ｔi質(zhì)粒，這樣可將目的基因整合到受體細(xì)胞的染色體上。移植入的目的基因?yàn)閱蝹�(gè)，故轉(zhuǎn)基因植株一般為雜合子。要避免基因污染，一般需將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的細(xì)胞質(zhì)（線(xiàn)粒體、葉綠體），不會(huì)隨著花粉進(jìn)行基因污染。

考點(diǎn)：本題考查基因工程相關(guān)知識(shí)，意在考查考生能理解所學(xué)知識(shí)的要點(diǎn)，把握知識(shí)間的內(nèi)在聯(lián)系能力。