【2010·浙江三校聯(lián)考】腫瘤是危害人類健康的重要疾病。某醫(yī)院病理室為確診一患者的腫瘤是否惡性,切取了其一小塊腫瘤組織進(jìn)行培養(yǎng)。請回答下列有關(guān)問題:
(1)進(jìn)行體外培養(yǎng)時,腫瘤組織必須先用____________________等處理成單個細(xì)胞。
(2)在培養(yǎng)中若要測量腫瘤細(xì)胞的數(shù)量,可以將待測樣品與等量的已知含量的紅細(xì)胞懸浮液混勻,涂布在載玻片上,經(jīng)處理后觀察。請設(shè)計一張用于記錄觀察數(shù)據(jù)的記錄表,并推導(dǎo)出計算腫瘤細(xì)胞數(shù)目的公式。
①觀察數(shù)據(jù)記錄表:
②腫瘤細(xì)胞數(shù)的計算公式:____________________
(3)若在腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)液中加入用3H標(biāo)記的胸腺嘧啶脫氧核苷酸,短暫培養(yǎng)一段時間后,洗去3H標(biāo)記的胸腺嘧啶脫氧核苷酸。使在該段時間內(nèi)已處于DNA復(fù)制期不同階段的全部細(xì)胞中DNA被3H標(biāo)記,而當(dāng)時處于其它時期的細(xì)胞則不帶標(biāo)記。不同時間取樣做細(xì)胞放射性自顯影,找出正處于有絲分裂的分裂期細(xì)胞,計算其中帶3H標(biāo)記的細(xì)胞占有絲分裂細(xì)胞的百分?jǐn)?shù)。得到下圖(圖1~圖4中橫軸為時間,縱軸為帶標(biāo)記細(xì)胞占總細(xì)胞數(shù)的百分?jǐn)?shù)):
①圖2中a點開始檢測到帶3H標(biāo)記分裂期細(xì)胞,則o-a為 期,理由是: 。
②圖2中b點帶3H標(biāo)記分裂期細(xì)胞數(shù)開始達(dá)到最大值,則a-b段表示 期,理由是: 。
③圖3中c點時,帶標(biāo)記的細(xì)胞百分?jǐn)?shù)開始下降,則a-c段表示哪些時期: 。
④此后,帶標(biāo)記的分裂期細(xì)胞數(shù)逐漸減少,直到消失,到第二次出現(xiàn)帶有標(biāo)記的細(xì)胞數(shù)時為圖表中e點,則一個完整的細(xì)胞周期為: 。
(4)某科研單位研制出一種新型藥物X,據(jù)說對此類腫瘤有較好的療效,能起到抑制腫瘤細(xì)胞分裂的作用。研究者設(shè)計了以下方案加以驗證,請將實驗步驟補充完整:將腫瘤細(xì)胞懸浮液分成等細(xì)胞數(shù)的A、B兩組。A組加入3H標(biāo)記的胸腺嘧啶脫氧核苷酸,B組應(yīng)加入 。相同條件下培養(yǎng)一段時間后,洗去培養(yǎng)液,把兩組細(xì)胞做相應(yīng)的處理,分別檢測兩組細(xì)胞的放射性強度。如果出現(xiàn)的實驗現(xiàn)象為 ,則說明此藥物的療效好。
(1)胰蛋白酶
(2)①觀察數(shù)據(jù)記錄表:
(要求:視野3個以上;要有平均值、紅細(xì)胞數(shù)、腫瘤細(xì)胞數(shù)記載欄。以上項目不全不給分)
視野1 | 視野2 | 視野3 | 視野4 | 視野5 | 平均值 | |
紅細(xì)胞數(shù) | ||||||
腫瘤細(xì)胞數(shù) |
②腫瘤細(xì)胞數(shù)的計算公式為ab/c
(a:紅細(xì)胞懸浮液中的紅細(xì)胞數(shù);b觀察到的視野中腫瘤細(xì)胞數(shù)的平均值;c:觀察到的視野中的紅細(xì)胞數(shù)的平均值)(無說明不給分)
(3)① G2 理由是:處于DNA復(fù)制最后階段的細(xì)胞最先出現(xiàn)標(biāo)記。
② 分裂期 理由是:a點后,原處于DNA復(fù)制期最后階段的細(xì)胞完成有絲分裂。
③ S G2 分裂期(不全不給分)
④ a-e
(4)等量的3H標(biāo)記的胸腺嘧啶脫氧核苷酸和藥物
A組細(xì)胞的放射性強度大于B組細(xì)胞
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