Question

【題目】為提高大豆對(duì)磷元素的吸收能力，研究人員利用桿菌轉(zhuǎn)化法將水稻的耐低磷基因OsPTF 轉(zhuǎn)移到大豆植株中，下圖為重組Ti質(zhì)粒上T-DNA的序列結(jié)構(gòu)示意圖。下列相關(guān)敘述不正確的是

A. 以水稻RNA為模板通過逆轉(zhuǎn)錄及PCR擴(kuò)增可獲得大量OsPTF基因

B. RNA聚合酶與啟動(dòng)子I識(shí)別并結(jié)合后，啟動(dòng)抗除草劑基因的轉(zhuǎn)錄

C. 可通過含除草劑的選擇培養(yǎng)基篩選含有目的的基因大豆愈傷組織

D. 用EcoRI、BamHI雙酶切重組Ti質(zhì)粒后，經(jīng)電泳分離至少得到兩條帶

Answer 1

【答案】B

【解析】

基因工程的基本操作步驟主要包括四步：

①目的基因的獲取，獲取方法包括：從基因文庫中獲取、PCR擴(kuò)增技術(shù)和人工合成法。

②基因表達(dá)載體的構(gòu)建，是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體的組成包括：?jiǎn)��?dòng)子、目的基因、終止子和標(biāo)記基因。

③將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞，根據(jù)不同的對(duì)象采用不同的導(dǎo)入方法，對(duì)植物細(xì)胞可以采用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；對(duì)于動(dòng)物采用顯微注射技術(shù)；對(duì)于微生物一般采用Ca2+轉(zhuǎn)化法。

④目的基因的檢測(cè)與鑒定，分子水平上的檢測(cè)方法包括：DNA分子雜交法、分子雜交法和抗原-抗體雜交法；也可以進(jìn)行個(gè)體水平上的鑒定，如抗性實(shí)驗(yàn)等。

以水稻RNA為模板通過逆轉(zhuǎn)錄可以合成cDNA，然后再以cDNA為模板利用PCR擴(kuò)增可獲得大量OsPTF基因，A正確；識(shí)圖分析可知，抗除草劑基因位于啟動(dòng)子Ⅱ的后面，因此RNA聚合酶與啟動(dòng)子Ⅱ識(shí)別并結(jié)合后，啟動(dòng)抗除草劑基因的轉(zhuǎn)錄，B錯(cuò)誤；由于圖中T-DNA的序列中含有目的基因和抗除草劑基因，故可通過含除草劑的選擇培養(yǎng)基篩選含有目的的基因大豆愈傷組織，C正確；用EcoRI、BamHI雙酶切重組Ti質(zhì)粒后，會(huì)得到三種片段：含有耐低磷基因OsPTF的片段、含有除草劑基因的片段和只含啟動(dòng)子I的片段，因此經(jīng)電泳分離至少得到兩條帶，即含耐低磷基因OsPTF的片段和含有除草劑基因的片段，D正確。