Question

【題目】I．科學(xué)家將人的生長激素基因與pBR322質(zhì)粒進(jìn)行重組，得到的重組質(zhì)粒導(dǎo)入牛的受精卵，使其發(fā)育為轉(zhuǎn)基因牛，再通過細(xì)胞工程培育為轉(zhuǎn)基因克隆牛。pBR322質(zhì)粒含有兩個(gè)抗生素抗性基因和5個(gè)限制酶切點(diǎn)(如圖2)。將重組質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌，并成功地在大腸桿菌中得以表達(dá)。請(qǐng)據(jù)圖回答問題。

(1)圖1中顯示的人的生長激素基因是通過人工合成的，圖中①過程需要的酶是__________。該過程所依據(jù)的堿基互補(bǔ)配對(duì)原則是___________________________(用字母和箭頭表示)。

(2)圖1中的mRNA是從人體的_______________細(xì)胞中獲取。

(3)重組質(zhì)粒形成與否需要鑒定和篩選，方法是將重組質(zhì)粒的DNA分子導(dǎo)入大腸桿菌，通過含抗生素的培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)，觀察大腸桿菌的生長、繁殖情況進(jìn)行判斷，如圖3所示：

如果受體菌在培養(yǎng)基A上能生長、繁殖形成菌落，而不能在培養(yǎng)基B上生長、繁殖，則使用限制酶a的切點(diǎn)是圖2中的___________________________________，即目的基因插入了___________________中。

II．SRY基因是Y染色體上的性別決定基因，SRY—PCR胚胎性別鑒定技術(shù)能準(zhǔn)確鑒定早期胚胎性別，應(yīng)用前景十分廣闊。請(qǐng)回答相關(guān)問題：

用SRY—PCR法鑒定胚胎性別需要充足的材料并保證被測(cè)胚胎的活性，因此，首先從被測(cè)胚胎中取出幾個(gè)細(xì)胞，提取_______________，然后用________________的一段脫氧核苷酸序列作引物，進(jìn)行PCR擴(kuò)增。鑒定擴(kuò)增產(chǎn)物，制備具有SRY基因特異性的探針，出現(xiàn)陽性反應(yīng)者，胚胎為__性。

Answer 1

【答案】逆轉(zhuǎn)錄酶A→T、U→A、G→C、C→G垂體切點(diǎn)3或切點(diǎn)4或切點(diǎn)5抗四環(huán)素基因DNASRY基因雄

【解析】試題分析：由圖可知，①是逆轉(zhuǎn)錄，②是獲取目的基因，切點(diǎn)1可破壞抗氨芐青霉素基因，切點(diǎn)3、4、5可破壞抗四環(huán)素基因，切點(diǎn)2對(duì)這兩個(gè)基因無影響。

I．（1）由圖可知，①過程是由RNA合成DNA過程，為逆轉(zhuǎn)錄過程，需要逆轉(zhuǎn)錄酶．RNA中的堿基是A、U、C、G，DNA中的堿基是A、T、C、G，所以配對(duì)方式是A→T、U→A、G→C、C→G。
（2）根據(jù)題意，生長激素基因是目的基因，該基因表達(dá)產(chǎn)物由垂體細(xì)胞分泌，所以需要從垂體細(xì)胞中提取mRNA。
（3）根據(jù)題意，受體菌能在含青霉素的培養(yǎng)基上生存，不能在含四環(huán)素的培養(yǎng)基上生存，所以限制酶切點(diǎn)位于抗四環(huán)素基因內(nèi)部，由圖可知，是切點(diǎn)3、4、5。

II．用SRY—PCR法鑒定胚胎性別需要充足的材料并保證被測(cè)胚胎的活性，因此，首先從被測(cè)胚胎中取出幾個(gè)細(xì)胞，提取DNA，然后用SRY基因的一段脫氧核苷酸序列作引物，進(jìn)行PCR擴(kuò)增。鑒定擴(kuò)增產(chǎn)物，制備具有SRY基因特異性的探針，出現(xiàn)陽性反應(yīng)者，胚胎為雄性。