Question

【題目】某農(nóng)田中發(fā)現(xiàn)一種廣泛使用的除草劑（含氮有機化合物）在土壤中不易降解，長期使用可導致土壤污染。為修復被該除草劑污染的土壤，可按下面流程選育能降解該除草劑的細菌（該除草劑在水中溶解度低，培養(yǎng)基不透明）。

（1） 在篩選目的菌過程中，應將土壤樣品稀釋液接種于以__為唯一氮源的固體培養(yǎng)基上，從功能上講，該培養(yǎng)基屬于__培養(yǎng)基。

（2）在劃線培養(yǎng)前，接種環(huán)應該在酒精燈火焰上__；在劃線接種時，連續(xù)劃線的目的是將聚集的菌種逐步__。

（3）在固體培養(yǎng)基上形成的菌落中，無透明帶菌落利用的氮源主要是__，有透明帶菌落利用的氮源主要是__，據(jù)此可篩選出目的菌。實驗結果如乙圖顯示的A～E五種菌株中，__是最理想菌株。

（4）制備土壤浸出液時，為避免菌體濃度過高，需將浸出液進行稀釋處理�，F(xiàn)有一升土壤浸出液，用無菌吸管吸取1mL液樣至盛有__mL無菌水的試管中，再稀釋103倍。各取0.1mL已稀釋的上述水樣分別接種到三個培養(yǎng)基上培養(yǎng)，記錄的菌落數(shù)分別為55、56、57，則每升原土壤浸出液樣中菌體數(shù)為__。

Answer 1

【答案】該除草劑 選擇 灼燒滅菌 稀釋以獲得單個菌落 氮氣 該除草劑 E 9 5.6×109

【解析】

雖然各種培養(yǎng)基的具體配方不同，但一般都含有水、碳源、氮源和無機鹽。在微生物學中，將允許特定種類的微生物生長，同時抑制或阻止其他種類微生物生長的培養(yǎng)基，稱做選擇培養(yǎng)基。

（1）據(jù)分析可知，在篩選目的菌過程中，應將土壤樣品稀釋液接種于以該除草劑為唯一氮源的固體培養(yǎng)基上，從功能上講，該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基。

（2）在劃線培養(yǎng)前，接種環(huán)應該在酒精燈火焰上灼燒滅菌；在劃線接種時，連續(xù)劃線的目的是將聚集的菌種逐步稀釋以獲得單個菌落，便于觀察和鑒別。

（3）在固體培養(yǎng)基上形成的菌落中，無透明帶菌落利用的氮源主要是氮氣，有透明帶菌落利用的氮源主要是該除草劑，據(jù)此可篩選出目的菌。實驗結果如乙圖顯示的A～E五種菌株中，E是最理想菌株，因為其產(chǎn)生的透明圈的直徑最大。

（4）制備土壤浸出液時，為避免菌體濃度過高，需將浸出液進行稀釋處理。現(xiàn)有一升土壤浸出液，用無菌吸管吸取1mL液樣至盛有10mL無菌水的試管中，再稀釋103倍。各取0.1mL已稀釋的上述水樣分別接種到三個培養(yǎng)基上培養(yǎng)，記錄的菌落數(shù)分別為55、56、57，則每升原土壤浸出液樣中菌體數(shù)為10×103×（0.1×10-3）×（55+56+57）/3=5.6×109。