【題目】大腸桿菌pUC18質(zhì)粒是基因工程中常用的運(yùn)載體。某限制酶在此質(zhì)粒上的唯一酶切位點(diǎn)位于LacZ基因中,如果沒有插入外源基因,LacZ基因便可表達(dá)出β-半乳糖苷酶,當(dāng)培養(yǎng)基中含有IPTG和X-gal時(shí),X-gal便會(huì)被β-半乳糖苷酶水解成藍(lán)色,大腸桿菌將形成藍(lán)色菌落。反之,則形成白色菌落。下圖表示利用此質(zhì)粒實(shí)施基因工程的主要流程。請(qǐng)分析并回答:
(1)已獲得的目的基因可利用_____________技術(shù)進(jìn)行擴(kuò)增。
(2)目的基因插入質(zhì)粒構(gòu)建重組質(zhì)粒的過程中,需要DNA連接酶恢復(fù)___________鍵。
(3)將試管Ⅰ中的物質(zhì)和大腸桿菌共同置于試管Ⅱ的目的是____________________;大腸桿菌需事先用Ca2+進(jìn)行處理,目的是______________________________________。
(4)將試管Ⅱ中的菌液接種于選擇培養(yǎng)基上培養(yǎng),培養(yǎng)基中除去含有大腸桿菌必需的營養(yǎng)物質(zhì)和生長因子外,還應(yīng)加入IPTG、X-gal以及氨芐青霉素,其中加入氨芐青霉素的作用是篩選出__________________。
(5)若觀察到培養(yǎng)基上出現(xiàn)______色菌落,則說明大腸桿菌中已成功導(dǎo)入了重組質(zhì)粒。如果作為受體細(xì)胞的大腸桿菌也含有LacZ基因,則不利于重組質(zhì)粒的篩選,原因是無論大腸桿菌是否導(dǎo)入重組質(zhì)粒,菌落均會(huì)呈現(xiàn)_________。
【答案】 PCR 磷酸二酯鍵 進(jìn)行轉(zhuǎn)化(將目的基因?qū)氪竽c桿菌) 使大腸桿菌細(xì)胞處于感受態(tài)(使大腸桿菌易于吸收環(huán)境中的DNA) 導(dǎo)入pUC18質(zhì)粒的大腸桿菌 白 藍(lán)色
【解析】試題分析:分析題圖:大腸桿菌pUC18質(zhì)粒含有氨芐青霉素抗性基因和LacZ基因,但限制酶的切割位點(diǎn)位于LacZ基因上,所以構(gòu)建成的重組質(zhì)粒含有氨芐青霉素抗性基因,但LacZ基因被破壞,不能產(chǎn)生β一半乳糖苷酶。試管Ⅰ中是基因表達(dá)載體,試管Ⅱ中是大腸桿菌,將試管I中的物質(zhì)和大腸桿菌共同置于試管Ⅱ的目的是進(jìn)行轉(zhuǎn)化,最后用選擇培養(yǎng)基進(jìn)行篩選。
(1)PCR技術(shù)能在短時(shí)間內(nèi)大量擴(kuò)增目的基因,所以已獲得的目的基因可利用PCR技術(shù)進(jìn)行擴(kuò)增。
(2)基因工程中,DNA連接酶作用后形成的是磷酸二脂鍵。
(3)將試管Ⅰ中的物質(zhì)和大腸桿菌共同置于試管Ⅱ的目的是使目的基因進(jìn)人受體細(xì)胞內(nèi),并在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá),即進(jìn)行轉(zhuǎn)化;大腸桿菌需事先用Ca2+進(jìn)行處理,增大細(xì)胞壁的通透性,使之處于易于吸收周圍環(huán)境中DNA分子的感受態(tài)。
(4)由于重組質(zhì)粒含有氨芐青霉素抗性基因,且沒有被破壞,因此導(dǎo)入重組質(zhì)粒的大腸桿菌能抗氨芐青霉素,所以培養(yǎng)基中加入氨芐青霉素的作用是篩選出導(dǎo)入pUC18質(zhì)粒的大腸桿菌。
(5)重組質(zhì)粒上的LacZ基因被破壞,不能產(chǎn)生β一半乳糖苷酶,若大腸桿菌中已成功導(dǎo)入了重組質(zhì)粒,則其在含有IPTG和X-gal的培養(yǎng)基中形成白色菌落.如果作為受體細(xì)胞的大腸桿菌也含有LacZ基因,則無論大腸桿菌是否導(dǎo)入重組質(zhì)粒,均會(huì)呈現(xiàn)藍(lán)色菌落。
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【題目】如圖是某生物的細(xì)胞分裂簡圖,下列有關(guān)敘述正確的是 ( )
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C. 該細(xì)胞為次級(jí)卵母細(xì)胞或次級(jí)精母細(xì)胞D. 該細(xì)胞分裂后可產(chǎn)生兩個(gè)基因組成相同的精子
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【題目】哥本哈根世界氣候大會(huì)所倡導(dǎo)的低碳生活獲得普遍認(rèn)同。溫室效應(yīng)是大氣中CO2過多,與碳循環(huán)失衡有關(guān)。圖示生態(tài)系統(tǒng)結(jié)構(gòu)及碳循環(huán)模式圖,①、②、③、④、⑤代表生理過程。據(jù)圖回答下列問題 :
(1)碳在生物群落和無機(jī)環(huán)境之間主要是以____________的形式進(jìn)行循環(huán),而在生物群落內(nèi)部則主要是以_____________的形式進(jìn)行流動(dòng)。
(2)①代表的生理過程是 _________________;
(3)寫出圖中含有的食物鏈(用字母表示)__________________
(4)生態(tài)系統(tǒng)中D和C的種間關(guān)系是 ____________,若A固定的能量不變,D的數(shù)量減少,則C可利用的能量___________。
(5)若生產(chǎn)者有10000kg,位于第三營養(yǎng)級(jí)的生物至少可獲得_____________kg。
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【題目】人體的下列細(xì)胞中,一定存在Y染色體的是( )
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①攜帶遺傳信息 ②上面有密碼子 ③能轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生mRNA ④能進(jìn)入核糖體 ⑤能運(yùn)載氨基酸 ⑥能控制蛋白質(zhì)的合成
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C.他們的孩子不可能是Rh陰性
D.他們有的孩子可能不產(chǎn)生淀粉酶
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