Question

目前人及動物用流行性感冒病毒疫苗的生產(chǎn)大多采用雞胚．這種傳統(tǒng)的方法勞動強度大，雞胚用量大，需要繁瑣的純化工藝去除雞胚蛋白減少過敏反應．流感的大流行性以及新發(fā)流感的流行迫切需要一種新的疫苗生產(chǎn)方法．如圖是一種RNA流感病毒疫苗研制流程．請回答有關(guān)的問題：

（1）流感病毒疫苗的簡要操作流程如下：圖中步驟①所代表的過程是

 

；步驟③可用

 

處理大腸桿菌，使其處于

 

；檢驗S基因是否翻譯成S蛋白的方法是

 

．
（2）如果要生產(chǎn)抗流感病毒的單克隆抗體，請你幫助完成制備單克隆抗體的主要步驟：
①用該流感病毒對小鼠進行注射，從產(chǎn)生免疫反應小鼠的脾臟中得到相應的B淋巴細胞；
②設(shè)法將鼠的

 

與B淋巴細胞融合，再用特定的選擇性培養(yǎng)基進行篩選，得到

 

的雜交瘤細胞；
③對上述雜交瘤細胞，還需進行

 

和抗體檢測，經(jīng)多次篩選，就可獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的細胞；
④將雜交瘤細胞在體內(nèi)或

 

培養(yǎng)，就可以從中提取出大量的能抗該流感病毒的單克隆抗體了．

Answer 1

考點：基因工程的原理及技術(shù),單克隆抗體的制備過程

專題：

分析：結(jié)合題意分析圖解：圖中步驟①由RNA→DNA，表示逆轉(zhuǎn)錄過程；步驟②表示基因表達載體的構(gòu)建；步驟③表示目的基因?qū)�入受體細胞；步驟④表示目的基因的檢測與鑒定．
分子水平上的檢測的方法：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．
單克隆抗體制備過程圖解：

解答： 解：（1）圖中步驟①所代表的過程是逆轉(zhuǎn)錄；一般受體細胞為原核生物時，可用Ca²⁺處理受體細胞，由于Ca²⁺能使細胞壁的通透性增加，能夠使受體細胞處于感受態(tài)細胞；檢驗S基因是否翻譯成S蛋白的方法是抗原一抗體雜交技術(shù)．
（2）①用該流感病毒對小鼠進行注射，從產(chǎn)生免疫反應小鼠的脾臟中得到相應的B淋巴細胞；
②設(shè)法將鼠的骨髓瘤細胞與B淋巴細胞融合，再用特定的選擇性培養(yǎng)基進行篩選，得到迅速大量繁殖，產(chǎn)生專一的抗體的雜交瘤細胞；
③對上述雜交瘤細胞，還需進行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測，經(jīng)多次篩選，就可獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的細胞；
④將雜交瘤細胞在體內(nèi)或體外培養(yǎng)，就可以從中提取出大量的能抗該流感病毒的單克隆抗體了．
故答案為：
（1）逆轉(zhuǎn)錄   Ca²⁺感受態(tài)細胞   抗原一抗體雜交實驗
（2）②骨髓瘤細胞    迅速大量繁殖，產(chǎn)生專一的抗體   ③克隆化培養(yǎng)   ④體外

點評：本題難度不大，屬于考綱中識記層次的要求，考查了基因工程中目的基因的獲取方法、目的基因的導入、目的基因的檢測以及單克隆抗體的制備過程等知識，要求考生具有一定的基礎(chǔ)知識，并能構(gòu)建一定的知識網(wǎng)絡(luò)，將單克隆抗體制備的過程利用圖解進行記憶．