Question

3．如圖表示培育轉(zhuǎn)熒光蛋白基因克隆豬的流程，請回答有關(guān)問題：

（1）過程①表示基因表達載體的構(gòu)建，其中用到的工具酶有DNA連接酶和限制性核酸內(nèi)切酶．
（2）過程②最常用的方法是顯微注射法．
（3）該培育流程中涉及的細胞工程技術(shù)有動物細胞培養(yǎng)、細胞核移植．
（4）若要同時獲得多頭轉(zhuǎn)熒光蛋白基因克隆豬，可在桑椹胚或囊胚期進行胚胎分割然后移植，進行該過程時應(yīng)注意將內(nèi)細胞團均等分割．

Answer 1

分析 分析題圖：該熒光克隆豬的培育涉及了多項生物工程技術(shù)．首先導(dǎo)入目的基因的豬胎兒成纖維細胞要經(jīng)過動物細胞培養(yǎng)篩選出轉(zhuǎn)基因體細胞，然后該細胞的細胞核與去核卵細胞進行細胞核移植獲得重組細胞，重組細胞經(jīng)過早期胚胎培養(yǎng)到桑葚胚或囊胚期，最后經(jīng)過胚胎移植技術(shù)將早期胚胎移植到代孕母豬子宮內(nèi)，最后生成熒光克隆豬．該過程中利用基因工程、動物細胞培養(yǎng)、細胞核移植、早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植等技術(shù)．

解答 解：（1）①表示基因表達載體的構(gòu)建過程．該過程中首先需要用限制酶切割含有目的基因的外源DNA和運載體，其次還需要用DNA連接酶將目的基因與運載體連接形成重組DNA．
（2）目的基因?qū)�入動物細胞最有效的方法是顯微注射法．
（3）上述過程中，導(dǎo)入目的基因的豬胎兒成纖維細胞要經(jīng)過動物細胞培養(yǎng)篩選出轉(zhuǎn)基因體細胞，然后該細胞的細胞核與去核卵細胞進行細胞核移植獲得重組細胞，重組細胞經(jīng)過早期胚胎培養(yǎng)到桑葚胚或囊胚期，最后經(jīng)過胚胎移植技術(shù)將早期胚胎移植到代孕母豬子宮內(nèi)，最后生成熒光克隆豬．其中涉及到的細胞水平現(xiàn)代生物技術(shù)主要有動物細胞培養(yǎng)、細胞核移植．
（4）進行胚胎分割時，應(yīng)選擇發(fā)育良好、形態(tài)正常的桑椹胚或囊胚．如果對囊胚進行分割時，應(yīng)對內(nèi)細胞團均等分割，否則會影響分割后胚胎的恢復(fù)和進一步發(fā)育．
故答案為：
（1）基因表達載體的構(gòu)建     DNA連接酶
（2）顯微注射法
（3）動物細胞培養(yǎng)  細胞核移植
（4）桑椹胚或囊胚    內(nèi)細胞團

點評 本題結(jié)合圖解，考查基因工程、細胞工程和胚胎工程的相關(guān)知識，要求考生識記基因工程的操作工具及操作步驟中，掌握各操作步驟中需要注意的細節(jié)；識記動物細胞工程的相關(guān)技術(shù)及其應(yīng)用；識記胚胎工程的相關(guān)技術(shù)及其應(yīng)用，能正確分析題圖，再結(jié)合所學(xué)的知識準確答題．