Question

【題目】運(yùn)用所學(xué)知識(shí)回答下列問題：
將蘇云金桿菌Bt蛋白的基因?qū)�入棉花�?xì)胞中，可獲得抗棉鈴蟲的轉(zhuǎn)基因棉，其過程如如圖所示（注：農(nóng)桿菌中Ti質(zhì)粒上只有T﹣DNA片段能轉(zhuǎn)移到植物細(xì)胞中）．

（1）過程①需用同種酶對(duì)含Bt基因的DNA和Ti質(zhì)粒進(jìn)行酶切．為將過程②獲得的含重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌篩選出來，應(yīng)使用培養(yǎng)基．
（2）過程③中將棉花細(xì)胞與農(nóng)桿菌混合后共同培養(yǎng)，旨在讓進(jìn)入棉花細(xì)胞；除盡農(nóng)桿菌后，還須轉(zhuǎn)接到含卡那霉素的培養(yǎng)基上繼續(xù)培養(yǎng)，目的是 ．
（3）檢驗(yàn)轉(zhuǎn)基因棉的抗蟲性狀，常用方法是 ． 種植轉(zhuǎn)基因抗蟲棉能減少的使用，以減輕環(huán)境污染．
（4）已知IgG抗體能消除狂犬病病毒．特異性IgG抗體獲取也可用單克隆抗體制備法，下面是單克隆抗體的制備過程示意圖，請(qǐng)回答下列問題．

①從小鼠的脾臟中取得B淋巴細(xì)胞之前，給小鼠注射的物質(zhì)A是 ．
②動(dòng)物細(xì)胞融合除了采用植物原生質(zhì)體融合常用的誘導(dǎo)方法外，還可以采用 ．
③B過程的目的是 ．
④單克隆抗體與常規(guī)的血清抗體相比，最大的優(yōu)越性是 ．

Answer 1

【答案】
（1）限制性核酸內(nèi)切酶,選擇
（2）T﹣DNA,篩選獲得T﹣DNA片段的植物細(xì)胞
（3）投放棉鈴蟲,農(nóng)藥
（4）狂犬病病毒（抗原）,滅活的病毒,篩選出能夠產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞,特異性強(qiáng),靈敏度高,可大量制備
【解析】解：（1）過程①表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建，為了獲得相同的黏性末端，需用同種限制性核酸內(nèi)切酶對(duì)含Bt基因的DNA和Ti質(zhì)粒進(jìn)行酶切．為將過程②獲得的含重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌篩選出來，應(yīng)使用選擇培養(yǎng)基．（2）過程③中將棉花細(xì)胞與農(nóng)桿菌混合后共同培養(yǎng)，旨在讓T﹣DNA進(jìn)入棉花細(xì)胞；除盡農(nóng)桿菌后，還須轉(zhuǎn)接到含卡那霉素的培養(yǎng)基上繼續(xù)培養(yǎng)，篩選獲得T﹣DNA片段的植物細(xì)胞．（3）檢驗(yàn)轉(zhuǎn)基因棉的抗蟲性狀，常用個(gè)體水平進(jìn)行鑒定，即投放棉鈴蟲．種植轉(zhuǎn)基因抗蟲棉能減少農(nóng)藥的使用，以減輕環(huán)境污染．（4）①制備單克隆抗體需要獲得已免疫的B淋巴細(xì)胞，因此需要給小鼠注射狂犬病病毒（抗原）．②植物原生質(zhì)體融合的方法包括物理法和化學(xué)法，動(dòng)物細(xì)胞融合除了這兩種誘導(dǎo)方法外，還可以采用滅活的病毒．③B過程的目的是篩選出能夠產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞．④單克隆抗體與常規(guī)的血清抗體相比，最大的優(yōu)越性是特異性強(qiáng)，靈敏度高，可大量制備．

所以答案是：（1）限制性核酸內(nèi)切酶 選擇 （2）T﹣DNA 篩選獲得T﹣DNA片段的植物細(xì)胞（3）投放棉鈴蟲 農(nóng)藥（4）①狂犬病病毒（抗原） ②滅活的病毒 ③篩選出能夠產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞④特異性強(qiáng)，靈敏度高，可大量制備

【考點(diǎn)精析】認(rèn)真審題，首先需要了解基因工程的原理及技術(shù)(基因工程的原理是利用DNA重組技術(shù))，還要掌握單克隆抗體的制備(對(duì)免疫小鼠注射特定的抗原蛋白；提取B淋巴細(xì)胞；同時(shí)用動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的方法培養(yǎng)骨髓瘤細(xì)胞并提��；促使它們細(xì)胞融合；在特定的選擇培養(yǎng)基上篩選出融合的雜種細(xì)胞；然后對(duì)它進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)；最后將雜交瘤細(xì)胞在體外做大規(guī)模培養(yǎng)或注射入小鼠腹腔內(nèi)增殖，從細(xì)胞培養(yǎng)液或小鼠腹水中可得到大量的單克隆抗體)的相關(guān)知識(shí)才是答題的關(guān)鍵．