Question

4．回答下列有關(guān)基因工程問題．
草甘膦是一種廣譜除草劑，其除草機(jī)制是抑制植物體內(nèi)EPSPS酶的合成，最終導(dǎo)致植物死亡．但是，它的使用有時也會影響到農(nóng)作物的正常生長．目前，已發(fā)現(xiàn)可以從一種抗草甘膦的大腸桿菌突變株中分離出EPSPS基因，若將該基因轉(zhuǎn)入農(nóng)作物植物細(xì)胞內(nèi)，從而獲得的轉(zhuǎn)基因植物就能耐受高濃度的草甘膦．
（1）如圖1A-F表示6株植物，其中，植物A和D對草甘膦敏感，B和E對草甘膦天然具有抗性，C和F則經(jīng)過了轉(zhuǎn)基因處理，但是否成功還未知．若A-C澆清水，D-F澆的水中含有草甘膦，上述植物中，肯定能健康成長的是ABCE．

（2）圖2所示的酶M和酶N是兩種限制酶，圖中DNA片段只注明了黏性末端處的堿基種類，其它堿基的種類未作注明．

多個片段乙和多個片段丁混合在一起，用DNA連接酶拼接得到環(huán)狀DNA，其中只由兩個DNA片段連接成的環(huán)狀DNA分子有3種．
（3）圖3中A和B分別表示兩段DNA序列．表格分別表示4種限制性核酸內(nèi)切酶的酶切位點(diǎn)．
據(jù)圖：假設(shè)位于EPSPS基因兩側(cè)的DNA序列均如圖A所示，則應(yīng)選擇表格中酶2進(jìn)行酶切；若位于EPSPS基因兩側(cè)的DNA序列分別如圖A和B所示，則應(yīng)選擇表中酶2和3進(jìn)行酶切．

Answer 1

分析 1、解答本題所需的關(guān)鍵信息是“植物A和D對草甘膦敏感，B和E對草甘膦天然具有抗性，C和F則經(jīng)過了轉(zhuǎn)基因處理，但是否成功還未知．”，再根據(jù)題干中的處理方法進(jìn)行判斷即可．
2、切割DNA的工具是限制性核酸內(nèi)切酶，又稱限制酶，限制酶是基因工程必需的工具酶，其特性是一種限制酶只能識別一種特定的核苷酸序列；依據(jù)圖M信息及題干相應(yīng)文字信息，可推出片段甲、乙、丙均有酶1切割形成，所以片段丁、戊是由酶2切割形成的，則酶N特異性剪切的DNA片段是；多個片段乙和多個片段丁混合，用DNA連接酶連接可形成乙乙、乙丁、丁丁三種連接方式（只考慮兩個DNA片段連接．

解答 解：（1）A-C澆的是清水，因此都能健康成長．D-F澆的水中含有草甘膦，其中D對草甘膦敏感，不能健康成長；E對草甘膦天然具有抗性，能健康成長；F雖經(jīng)過了轉(zhuǎn)基因處理，但是否成功還未知，因此不一定能健康成長．因此，上述植物中肯定能健康成長的是ABCE．
（2）將多個片段乙和多個片段丁混合在一起，用DNA連接酶拼接得到環(huán)狀DNA，其中只由兩個DNA片段連接成的環(huán)狀DNA分子有3種情況，分別是乙與丁相連，乙與乙相連，丁與丁相連． 
（3）利用表格信息及限制性酶2和限制酶3的酶切位點(diǎn)可推知假設(shè)位于EPSPS基因兩側(cè)的DNA序列均如圖2中A所示，則應(yīng)選擇表格中酶2進(jìn)行酶切；若位于EPSPS基因兩側(cè)的DNA序列分別如圖2中A和B所示，則應(yīng)選擇表中酶2和3進(jìn)行酶切．
故答案為：
（1）ABCE
（2）3
（3）2    2和3

點(diǎn)評 本題考查基因工程相關(guān)知識，理解限制酶的作用特點(diǎn)是解題的關(guān)鍵，同時要求學(xué)生具備分析圖形的能力．