Question

【題目】回答下列（一）、（二）小題：

（一）回答與泡菜制作有關的問題：

（1）用蘿卜等根菜類蔬菜制作泡菜，用熱水短時處理，可抑制某些微生物產(chǎn)生_____，從而使成品泡菜口感較脆。同時，該處理也會使泡菜發(fā)酵時間縮短，其原因是_______。

（2）泡菜發(fā)酵初期，由于泡菜罐加蓋并水封，會使______菌被逐漸抑制。發(fā)酵中期，乳酸菌大量繁殖，會使______菌受到抑制。發(fā)酵后期，乳酸生產(chǎn)過多，會使乳酸菌受到抑制。

（3）從泡菜汁中可分離制作酸奶的乳酸菌，首先對經(jīng)多次發(fā)酵的泡菜汁進行過濾，然后取濾液進行______，再用______的方法在某種含牛乳的專用的培養(yǎng)基中進行初步篩選。該培養(yǎng)基必須含有______，以便于觀察是否產(chǎn)酸。

（4）自然界中醋桿菌常與乳酸菌共同生長。若要篩選出醋桿菌，則其專用的培養(yǎng)基中應添加______。

（二）回答與基因工程和植物克隆有關的問題：

（1）為了獲取某植物葉片無菌的原生質體，先將葉片經(jīng)表面消毒并去除下表皮，再將其置于經(jīng)______處理的較高滲透壓的混合酶液中。酶解后，經(jīng)多次離心獲得原生質體。然后測定該原生質體的活性，可采用的方法有______（答出2點即可）。

（2）若要獲得已知序列的抗病基因，可采用______或PCR的方法。為了提高目的基因和質粒重組的成功率，選擇使用______，對含目的基因的DNA片段進行處理，使其兩端形成不同的粘性末端，對質粒也進行相同的處理，然后用DNA連接酶連接形成重組質粒。通過在大腸桿菌中______，以獲得大量的重組質粒，最終將其導入原生質體中。

（3）原生質體在培養(yǎng)過程中，只有重新形成______后，才可進行有絲分裂。多次分裂形成的小細胞團可通過______或器官發(fā)生的途徑再生植株。

Answer 1

【答案】果膠酶 細胞破裂，細胞內(nèi)營養(yǎng)物質外流使乳酸菌快速地獲得營養(yǎng)物質 喜好氧的 不耐酸的 稀釋 涂布分離 酸堿指示劑 乙醇 過濾滅菌 染色法，滲透吸水或失水 化學合成 兩種限制性核酸內(nèi)切酶 擴增 細胞壁 胚胎發(fā)生

【解析】

泡菜制作：

①菌種：假絲酵母和乳酸菌；②發(fā)酵原理：在無氧條件下，微生物利用菜中的糖和其他營養(yǎng)物質進行發(fā)酵，發(fā)酵產(chǎn)物有有機酸和醇類物質等，還有亞硝酸。③亞硝酸鹽的測定：亞硝酸鹽可與對氨基苯磺酸發(fā)生重氮化反應，這一產(chǎn)物再與N-1-萘基乙二胺偶聯(lián)，形成紫紅色產(chǎn)物，可用光電比色法定量。

（一）

（1）用蘿卜等根菜類蔬菜制作泡菜時，為抑制某些微生物產(chǎn)生果膠酶，從而使成品泡菜口感較脆，可用熱水短時處理。同時，該處理也會使細胞破裂，細胞內(nèi)營養(yǎng)物質外流使乳酸菌快速地獲得營養(yǎng)物質，從而使泡菜發(fā)酵時間縮短。

（2）泡菜發(fā)酵初期，由于泡菜罐加蓋并水封，形成無氧環(huán)境，會使喜好氧的菌被逐漸抑制。發(fā)酵中期，乳酸菌大量繁殖，產(chǎn)生乳酸，會使不耐酸的菌受到抑制。發(fā)酵后期，乳酸生產(chǎn)過多，又會抑制乳酸菌。

（3）從泡菜汁中可分離制作酸奶的乳酸菌，首先對經(jīng)多次發(fā)酵的泡菜汁進行過濾，然后取濾液進行稀釋，再用涂布分離的方法在某種含牛乳的專用的培養(yǎng)基中進行初步篩選。為了便于觀察是否產(chǎn)酸，該培養(yǎng)基必須含有酸堿指示劑。

（4）自然界中醋桿菌常與乳酸菌共同生長。由于醋酸桿菌可以利用乙醇產(chǎn)生醋酸，若要篩選出醋桿菌，則其專用的培養(yǎng)基中應添加乙醇。

（二）

（1）為了獲取某植物葉片無菌的原生質體，先將葉片經(jīng)表面消毒并去除下表皮，再將其置于經(jīng)過濾滅菌處理的較高滲透壓的混合酶液中。酶解后，經(jīng)多次離心獲得原生質體�？刹捎萌旧�法、滲透吸水或失水的方法測定該原生質體的活性。

（2）可采用人工合成或PCR的方法獲得已知序列的抗病基因。對含目的基因的DNA片段進行處理，為使其兩端形成不同的粘性末端，需要選擇使用兩種限制性核酸內(nèi)切酶，對質粒也進行相同的處理，為了提高目的基因和質粒重組的成功率，然后用DNA連接酶連接形成重組質粒。通過在大腸桿菌中擴增，以獲得大量的重組質粒，最終將其導入原生質體中。

（3）原生質體在培養(yǎng)過程中，只有重新形成細胞壁后，才可進行有絲分裂。多次分裂形成的小細胞團可通過胚胎發(fā)生或器官發(fā)生的途徑再生植株。