Question

(15分)生物興趣小組試圖探究牛和山羊的瘤胃中的微生物對尿素是否有分解作用，設(shè)計了以下實驗，并成功篩選到能降解尿素的細菌（目的菌）。培養(yǎng)基成分如左表所示，實驗步驟如右圖所示。請分析回答問題：

（1）培養(yǎng)基中加入尿素的目的是___________，原理是_____________。從同化作用類型來看的，該菌屬于____________________。

（2）實驗需要振蕩培養(yǎng)，原因是______________。轉(zhuǎn)為固體培養(yǎng)時，常采用________的方法接種，獲得單菌落后繼續(xù)篩選。

（3）在實驗過程中：①培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿；②玻棒、試管、錐形瓶、吸管；③瘤胃中液體。其中需要滅菌是____________（填序號）。

（4）分離分解尿素的細菌實驗時，甲同學(xué)從培養(yǎng)基上篩選出大約150個菌落，而其他同學(xué)只選擇出大約50個菌落。甲同學(xué)實驗結(jié)果差異的原因可能有__________（填序號）

①取樣不同 ②培養(yǎng)基污染 ③操作失誤 ④沒有設(shè)置對照

（5）以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基培養(yǎng)“目的菌”后，加入_________指示劑后變紅色，說明“目的菌”能分解尿素。理由是_____________________。

（6）為進一步確定取自瘤胃中液體的適當(dāng)稀釋倍數(shù)，將接種的培養(yǎng)皿放置在37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h～48h，觀察并統(tǒng)計具有紅色環(huán)帶的菌落數(shù)，結(jié)果如下表，其中_____________倍的稀釋比較合適。

Answer 1

（1）篩選目的菌 只有能合成脲酶的細菌才能分解尿素，在該培養(yǎng)基上生長

異養(yǎng)型

（2）為目的菌提供氧氣 涂布平板法 （3）①和② （4）①②③

（5）酚紅指示劑 細菌合成的脲酶將尿素分解為氨，pH增高，使酚紅指示劑變紅(2分)

（6）106或105

【解析】

試題分析：

（1）培養(yǎng)基中加入尿素的目的是篩選能高效降解尿素的目的菌，其原理是只有能合成脲酶的細菌才能分解尿素，才能在以尿素為氮源的培養(yǎng)基上生長；由于培養(yǎng)基中需要的碳源為葡萄糖，說明該菌不能自己制造有機物，為異養(yǎng)型生物。

（2）振蕩培養(yǎng)的目的是為目的菌提供氧氣；轉(zhuǎn)為固體培養(yǎng)時，要想獲得單個菌落，最好采用稀釋涂布平板法。

（3）在實驗中，為了防止雜菌污染，對培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿、玻璃棒、試管、錐形瓶、吸管等培養(yǎng)器具要進行滅菌處理，即對①②進行滅菌，瘤胃中的液體是實驗材料，不能滅菌。

（4）甲同學(xué)培養(yǎng)的菌落較多，可能是取樣不同造成的，也可能是培養(yǎng)過程中培養(yǎng)基被污染或操作失誤，即①②③會造成菌落數(shù)增多。

（5）目的菌中的脲酶能把培養(yǎng)基中的尿素分解成氨，氨可以使培養(yǎng)基中的pH升高，從而是酚紅指示劑變紅。

（6）分析表格中數(shù)據(jù)，當(dāng)稀釋倍數(shù)為106或105時，菌落數(shù)分別是36和248個，為30～300之間。

考點：本題考查微生物的實驗室培養(yǎng)的有關(guān)知識，意在考查考生識記能力和理解所學(xué)知識的要點，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系的能力。