Question

【題目】炭疽桿菌能引起人畜患炭疽病．對(duì)炭疽病疑似患者，可通過圖1所示鑒定炭疽桿菌的實(shí)驗(yàn)進(jìn)行確診．下表是培養(yǎng)炭疽桿菌的血瓊脂培養(yǎng)基成分，其中實(shí)驗(yàn)組中的噬菌體能特異性地侵染炭疽桿菌。

蛋白胨	10g
牛肉粉	3g
氯化鈉	5g
脫纖維羊血 （含多種生長因子）	50mL
瓊脂	15g
去離子水	1000mL

（1）據(jù)表分析“血瓊脂培養(yǎng)基”屬于_____．

①通用培養(yǎng)基 ②選擇培養(yǎng)基 ③固體培養(yǎng)基 ④液體培養(yǎng)基

（2）為從炭疽病疑似患者體內(nèi)分離出炭疽桿菌，將采集到的患者皮膚膿胞滲出物稀釋后滴于培養(yǎng)基表面，用無菌玻璃刮鏟涂勻，這種接種方法稱為_____．圖2所示的四種菌落分布圖中，不可能由該方法得到的是_____．

（3）制備圖1中的液體培養(yǎng)基時(shí)需采取_____方法滅菌，目的是_____。

（4）據(jù)圖1分析，接種可疑菌后，經(jīng)35℃培養(yǎng)24小時(shí)，液體培養(yǎng)基變渾濁，原因是_____，對(duì)照組試管中應(yīng)加入_____，與實(shí)驗(yàn)組同時(shí)培養(yǎng)6小時(shí)后，若實(shí)驗(yàn)組液體培養(yǎng)基的渾濁度比對(duì)照組_____（填“高”或“低”），則可明確疑似患者被炭疽桿菌感染；反之則排除．此實(shí)驗(yàn)依據(jù)的原理是_____

（5）對(duì)排除的疑似患者及易感人群，可采取的最有效的預(yù)防措施是_____。

Answer 1

【答案】①③ 稀釋涂布平板法 D 高壓蒸汽滅菌 殺死微生物及芽孢 細(xì)菌大量繁殖 等量生理鹽水 低 實(shí)驗(yàn)組中的噬菌體能特異性地侵染炭疽桿菌，使細(xì)菌死亡，溶液變澄清 接種炭疽疫苗

【解析】

1、培養(yǎng)基的基本成分：水、無機(jī)鹽、碳源、氮源及特殊生長因子；

2、無菌操作，包括滅菌和消毒兩種方式，消毒的方法有巴氏消毒法、酒精消毒、煮沸消毒法；滅菌的方法有干熱滅菌、灼燒滅菌和高壓蒸汽滅菌；

3、微生物的接種：微生物接種的方法很多，最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法，常用來統(tǒng)計(jì)樣品活菌數(shù)目的方法是稀釋涂布平板法。

4、微生物實(shí)驗(yàn)室分離中配制培養(yǎng)基的操作步驟：計(jì)算→稱量→溶解→調(diào)pH→滅菌步驟。

5、培養(yǎng)基的分類有按物理性質(zhì)分有固體、半固體、液體培養(yǎng)基；按用途分為選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基。

（1）根據(jù)表格分析，該培養(yǎng)基含有牛肉膏、蛋白胨，是細(xì)菌的通用培養(yǎng)基，又因?yàn)楹�有瓊脂，為固體培養(yǎng)基。

故選①③。

（2）稀釋涂布平板法則是將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分布涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進(jìn)行培養(yǎng)。由圖中四種菌落分布情況可知，A、B和C是采用稀釋涂布平板法得到的，而D是采用平板劃線法得到的。

（3）制備圖1中的液體培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)該用高壓蒸汽滅菌法進(jìn)行滅菌，以殺死微生物及芽孢。

（4）接種可疑菌后，35℃培養(yǎng)24小時(shí)，細(xì)菌大量繁殖，液體培養(yǎng)基變渾濁；對(duì)照組試管中應(yīng)加入等量生理鹽水，與實(shí)驗(yàn)組同時(shí)培養(yǎng)6小時(shí)后，若實(shí)驗(yàn)組液體培養(yǎng)基的渾濁度比對(duì)照組低，則可明確疑似患者被炭疽桿菌感染；反之則排除；此實(shí)驗(yàn)依據(jù)的原理是實(shí)驗(yàn)組中的噬菌體能特異性地侵染炭疽桿菌，使細(xì)菌死亡，溶液變澄清。

（5）對(duì)排除的疑似患者及易感人群，可接種炭疽桿菌疫苗，刺激機(jī)體產(chǎn)生相應(yīng)抗體和記憶細(xì)胞而獲得沒免疫能力。