【題目】下表是幾種限制酶識(shí)別序列及其切割位點(diǎn),圖1、圖2中標(biāo)注了相關(guān)限制酶的酶切位點(diǎn),其中切割位點(diǎn)相同的酶不重復(fù)標(biāo)注。請(qǐng)回答下列問(wèn)題:
限制酶 | BamH | Bcl | Sau3A | HindⅢ |
識(shí)別序列及切割位點(diǎn) | G↓GATCC CCTAG↑G | T↓GATCA ACTAG↑T | ↓GATC CTAG↑ | A↓AGCTT TTCGA↑A |
(1)用圖中質(zhì)粒和目的基因構(gòu)建重組質(zhì)粒,應(yīng)選用________和______兩種限制酶切割,酶切后的載體和目的基因片段,通過(guò)________酶作用后獲得重組質(zhì)粒。為了擴(kuò)增重組質(zhì)粒,需將其轉(zhuǎn)入處于________態(tài)的大腸桿菌。
(2)為了篩選出轉(zhuǎn)入了重組質(zhì)粒的大腸桿菌,應(yīng)在篩選平板培養(yǎng)基中添加________,平板上長(zhǎng)出的菌落,常用PCR鑒定,所用的引物組成為圖2中________。
(3)若BamHⅠ酶切的DNA末端與BclⅠ酶切的DNA末端連接,連接部位的6個(gè)堿基對(duì)序列為_______,對(duì)于該部位,這兩種酶_______(填“都能”“都不能”或“只有一種能”)切開(kāi)。
(4)若用Sau3AⅠ切圖1質(zhì)粒最多可能獲得________種大小不同的DNA片段。
【答案】BclⅠ HindⅢ DNA連接 感受 四環(huán)素 引物甲和引物丙 都不能 7
【解析】
基因工程技術(shù)的基本步驟:
1、目的基因的獲。悍椒ㄓ袕幕蛭膸(kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。
2、基因表達(dá)載體的構(gòu)建:是基因工程的核心步驟,基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。
3、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞:根據(jù)受體細(xì)胞不同,導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法;將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法;將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。
4、目的基因的檢測(cè)與鑒定:
(1)分子水平上的檢測(cè):①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因——DNA分子雜交技術(shù);②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA——分子雜交技術(shù);③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)——抗原——抗體雜交技術(shù)。
(2)個(gè)體水平上的鑒定:抗蟲(chóng)鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。
(1)選擇的限制酶應(yīng)在目的基因兩端存在識(shí)別位點(diǎn),但BamHⅠ可能使質(zhì)粒中的啟動(dòng)子丟失,因此只能選BclI和HindⅢ兩種限制酶切割。酶切后的載體和目的基因片段,通過(guò)連接酶作用后獲得重組質(zhì)粒。為了擴(kuò)增重組質(zhì)粒,需將其轉(zhuǎn)入處于感受態(tài)的大腸桿菌。
(2)為了篩選出轉(zhuǎn)入了重組質(zhì)粒的大腸桿菌,根據(jù)質(zhì)粒上的抗性基因,應(yīng)在篩選平板培養(yǎng)基中添加四環(huán)素。PCR技術(shù)要求兩種引物分別和目的基因的兩條單鏈結(jié)合,沿相反的方向合成子鏈,故所用的引物組成為圖2中引物甲和引物丙。
(3)根據(jù)BamHⅠ和BclI的酶切位點(diǎn),若BamHI酶切的DNA末端與BclI酶切的DNA末端連接,則連接部位的6個(gè)堿基對(duì)序列為,對(duì)于該部位,由于與兩種酶的酶切位點(diǎn)均不同,故這兩種酶都不能切開(kāi)。
(4)根據(jù)BamHⅠ、BclI和Sau3A I的酶切位點(diǎn),Sau3A I在質(zhì)粒上有三個(gè)酶切位點(diǎn),完全酶切可得到記為A、B、C三種片段,若部分位點(diǎn)被切開(kāi),可得到AB、AC、BC、ABC四種片段,所以用Sau3A I切圖1質(zhì)粒最多可能獲得7種大小不同的DNA片段。
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科目:高中生物 來(lái)源: 題型:
【題目】腎上腺糖皮質(zhì)激素是一種可使血糖升高的動(dòng)物激素,當(dāng)人體受到某一外界刺激后體內(nèi)會(huì)發(fā)生如圖所示的過(guò)程。據(jù)圖分析,下列敘述正確的是
A. 人體內(nèi)腎上腺糖皮質(zhì)激素的調(diào)節(jié)與甲狀腺激素的調(diào)節(jié)機(jī)理不同
B. 腎上腺糖皮質(zhì)激素與胰島素具有協(xié)同作用
C. 神經(jīng)遞質(zhì)作用于下丘腦細(xì)胞并不需要經(jīng)過(guò)內(nèi)環(huán)境
D. 下丘腦細(xì)胞上既有接受神經(jīng)遞質(zhì)的受體也有接受腎上腺糖皮質(zhì)激素的受體
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科目:高中生物 來(lái)源: 題型:
【題目】下圖是機(jī)體的免疫反應(yīng)清除抗原的過(guò)程示意圖,下列敘述正確的是( )
A.圖中的免疫細(xì)胞都來(lái)源于造血干細(xì)胞,在相同器官中成熟
B.與漿細(xì)胞相比,效應(yīng)T細(xì)胞具有更多的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體
C.再次遇到相同抗原時(shí),圖中的甲細(xì)胞能快速增殖分化形成漿細(xì)胞
D.效應(yīng)T細(xì)胞引起靶細(xì)胞死亡并不能直接消滅清除其中的抗原
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科目:高中生物 來(lái)源: 題型:
【題目】下圖是從酵母菌中獲取某種具有利用價(jià)值的目的基因的流程圖,請(qǐng)結(jié)合所學(xué)知識(shí)及相關(guān)信息回答下列問(wèn)題:
(1)圖中基因組文庫(kù)與cDNA文庫(kù)的大小關(guān)系是______________________。
(2)A過(guò)程提取DNA需要用到的酶是___________,B過(guò)程需要用到的酶是___________酶。
(3)要在短時(shí)間內(nèi)大量獲得目的基因,可用___________技術(shù)進(jìn)行擴(kuò)增。
(4)將該目的基因?qū)胫参锛?xì)胞,常采用的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法,其能否在此植物體內(nèi)穩(wěn)定遺傳的關(guān)鍵是______________________。
(5)要想使該目的基因的表達(dá)產(chǎn)物(某種蛋白質(zhì)酶)具有更強(qiáng)的活性,需要通過(guò)蛋白質(zhì)工程,其基本途徑是預(yù)期蛋白質(zhì)功能→設(shè)計(jì)預(yù)期蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)→__________________→找到相對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸序列。
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科目:高中生物 來(lái)源: 題型:
【題目】如圖是細(xì)胞中DNA包裝成染色體的示意圖,下列敘述正確的是( )
A.DNA分子中核糖與磷酸基團(tuán)交替排列,構(gòu)成了其基本骨架
B.若DNA的一條單鏈中A占24%,則雙鏈中A+T占48%
C.減數(shù)分裂完成后,子細(xì)胞中含親代DNA鏈的染色體占1/2
D.制作DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)模型,可用6種材料代表不同基團(tuán)
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科目:高中生物 來(lái)源: 題型:
【題目】圖中甲曲線(xiàn)表示在最適溫度下,某種酶促反應(yīng)速率與反應(yīng)物濃度之間的關(guān)系。其余兩條曲線(xiàn)分別表示該酶促反應(yīng)速率隨pH或溫度的變化趨勢(shì)。下列分析正確的是
A.在A點(diǎn)適當(dāng)提高溫度,反應(yīng)速率將增大
B.由圖可知,D點(diǎn)和H點(diǎn)對(duì)應(yīng)的條件是儲(chǔ)存酶的較佳條件
C.圖中E點(diǎn)對(duì)應(yīng)的條件為該酶的最適pH,H點(diǎn)對(duì)應(yīng)的條件為該酶的最適溫度
D.由圖可知,酶具有高效性
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科目:高中生物 來(lái)源: 題型:
【題目】某二倍體自花傳粉植物的株高受位于染色體上完全顯性的復(fù)等位基因A、、控制,其中A決定高莖,決定中莖,決定矮莖,A對(duì)和是顯性。在不考慮變異的情況下,下列相關(guān)敘述,錯(cuò)誤的是( )
A.A、、基因的遺傳遵循基因的分離定律
B.理論上該植物種群中決定株高的基因型最多有6種
C.兩株表現(xiàn)型不同的植株雜交后代最多有三種表現(xiàn)型
D.只能利用自交的方法來(lái)確定、基因的顯隱性關(guān)系
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科目:高中生物 來(lái)源: 題型:
【題目】雜合體(EeLl)經(jīng)減數(shù)分裂產(chǎn)生了四種類(lèi)型的配子:EL、eL、El、el,其中El和eL配子各占42%,這個(gè)雜合體基因型的正確表示應(yīng)是( )
A.B.
C.D.
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科目:高中生物 來(lái)源: 題型:
【題目】如圖所示,大腸桿菌R1質(zhì)粒DNA片段上有hok基因和sok基因,其中hok基因編碼的毒蛋白能導(dǎo)致細(xì)胞裂解死亡;sokmRNA能與hokmRNA結(jié)合,結(jié)合產(chǎn)物能被酶降解;卮鹣铝袉(wèn)題。
(1)DNA與RNA在化學(xué)組成上的區(qū)別是__________。
(2))圖中過(guò)程②發(fā)生的場(chǎng)所是__________,其產(chǎn)物毒蛋白的基本組成單位是__________。
(3)sokmRNA與hokmRNA的堿基序列__________(填“相同”或“不相同”)。
(4)據(jù)圖可知,sokmRNA能夠抑制hok基因表達(dá)中的__________過(guò)程。
(5)如果hok基因發(fā)生突變,導(dǎo)致hokmRNA中一個(gè)堿基被另一個(gè)堿基替換,但未引起毒蛋白中氨基酸序列的改變,其原因可能是____________________。
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