Question

7．矮牽牛植株再生容易，是進(jìn)行遺傳轉(zhuǎn)化研究植物花色變化的模式植物．為符合大眾的審美需要改良矮牽牛的花色性狀，成為擴(kuò)大矮牽牛產(chǎn)業(yè)規(guī)模的必然途徑．矮牽牛的花色基因工程中，常用農(nóng)桿菌介導(dǎo)技術(shù)進(jìn)行操作．
（1）培育“轉(zhuǎn)基因矮牽�！钡幕�因工程操作四步曲中，其核心是基因表達(dá)載體的構(gòu)建，該過(guò)程用到的工具酶有限制酶和DNA連接酶．
（2）Ti質(zhì)粒是獨(dú)立于農(nóng)桿菌擬核外的，能夠自主復(fù)制的環(huán)狀DNA分子．當(dāng)植物體受損時(shí)，傷口處的細(xì)胞會(huì)分泌大量的酚類化合物，吸引農(nóng)桿菌移向這些細(xì)胞．
（3）在矮牽牛的花色基因工程操作中將與植物花青素代謝有關(guān)的基因轉(zhuǎn)移至T-DNA，然后在一定條件下降外植體在含農(nóng)桿菌的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，此時(shí)修飾的T-DNA可以傳入植物細(xì)胞，并整合到植物基因組（染色體DNA）中．

Answer 1

分析 1、基因工程的工具有：限制性核酸內(nèi)切酶、DNA連接酶和運(yùn)載體．需要限制酶來(lái)切割以獲取目的基因，同時(shí)需要相同的限制酶切割運(yùn)載體以獲取與目的基因相同的黏性末端，再通過(guò)DNA連接酶連接目的基因和運(yùn)載體．
2、農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法：
①農(nóng)桿菌特點(diǎn)：易感染雙子葉植物和裸子植物，對(duì)單子葉植物沒(méi)有感染力；Ti質(zhì)粒的T-DNA可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞，并整合到受體細(xì)胞的染色體上．
②原理：農(nóng)桿菌中的Ti質(zhì)粒上的T-DNA可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞，并且整合到受體細(xì)胞染色體的DNA上．根據(jù)農(nóng)桿菌的這一特點(diǎn)，如果將目的基因插入到Ti質(zhì)粒的T-DNA上，通過(guò)農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)化作用，就可以把目的基因整合到植物細(xì)胞中染色體的DNA．

解答 解：（1）基因工程的核心步驟是基因表達(dá)載體的構(gòu)建，該過(guò)程需要用同種限制酶切割目的基因和運(yùn)載體，再利用DNA連接酶構(gòu)建重組質(zhì)粒．
（2）Ti質(zhì)粒是獨(dú)立于農(nóng)桿菌擬核外的，能夠自主復(fù)制的環(huán)狀DNA分子．當(dāng)植物體受損時(shí)，傷口處的細(xì)胞會(huì)分泌大量的酚類化合物，吸引農(nóng)桿菌移向這些細(xì)胞．
（3）農(nóng)桿菌中的Ti質(zhì)粒上的T-DNA可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞，并且整合到受體細(xì)胞染色體的DNA上．因此在矮牽牛的花色基因工程操作中將與植物花青素代謝有關(guān)的基因轉(zhuǎn)移至T-DNA，然后在一定條件下降外植體在含農(nóng)桿菌的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，此時(shí)修飾的T-DNA可以傳入植物細(xì)胞，并整合到植物基因組（染色體DNA）中．
故答案為：
（1）基因表達(dá)載體的構(gòu)建    限制酶和DNA連接酶
（2）擬核  復(fù)制   酚類
（3）與植物花青素代謝有關(guān)的     農(nóng)桿菌     植物基因組（染色體DNA）

點(diǎn)評(píng) 本題考查基因工程的有關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的工具及操作步驟，把握各步驟中采用的方法，識(shí)記農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法的原理和方法，能運(yùn)用所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題，屬于考綱識(shí)記層次的考查．